ELISA試劑盒廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定,具有靈敏度高,操作簡(jiǎn)單等優(yōu)點(diǎn),但是在具體實(shí)驗(yàn)過程中影響因素較多,并且要按照嚴(yán)格的說明要求,在臨床檢驗(yàn)中除正常反應(yīng)外,有時(shí)??梢姷揭恍╁e(cuò)誤結(jié)果(即假陽(yáng)性或假陰性結(jié)果)。由于抗體聯(lián)結(jié)上了酶,因此,借助于酶與底物的顯色反應(yīng),顯示抗原與抗體的結(jié)合,大大提高了檢測(cè)的靈敏性,使檢測(cè)水平接近放射免疫測(cè)定法。
ELISA試劑盒檢測(cè)處理步驟:
1.試驗(yàn)真實(shí)值
從理論上說,樣品中某一組分的含量必定有一個(gè)客觀存在的真實(shí)數(shù)值,稱之為“真實(shí)值”或“真值”。用“μ”表明。但實(shí)踐上,關(guān)于客觀存在的真值,人們不可能準(zhǔn)確的知道,只能跟著測(cè)量技能的不斷進(jìn)步而逐漸靠近真值。實(shí)踐工作中,往往用“標(biāo)準(zhǔn)值”代替“真值”。
2. 標(biāo)準(zhǔn)值
ELISA試劑盒選用多種牢靠的分析方法、由具有豐盛閱歷的分析人員通過重復(fù)多次測(cè)定得出的效果平均值,是一個(gè)比較準(zhǔn)確的效果.實(shí)踐工作中一般用標(biāo)準(zhǔn)值代替真值。例如原子量、物理化學(xué)常數(shù):阿佛伽得羅常數(shù)為6.02×10 等。與我們?cè)囼?yàn)相關(guān)的是將純物質(zhì)中元素的理論含量作為真實(shí)值。
3. 試驗(yàn)準(zhǔn)確度
準(zhǔn)確度是測(cè)定值與真實(shí)值靠近的程度。為了獲得牢靠的效果,在實(shí)踐工作中人們總是在相同條件下,多測(cè)定幾回,然后求平均值,作為測(cè)定值。一般把這幾回在相同條件下的測(cè)定叫平行測(cè)定。如果這幾個(gè)數(shù)據(jù)彼此比較靠近,就說明分析的精密度高。
4. 精密度
ELISA試劑盒精密度是幾回平行測(cè)定效果彼此靠近的程度。